طراحی بیوانفورماتیک و ساخت ایمونوژن RBD علیه اتصال ویروس SARS CoV_2

نوع مقاله : زیست- میکروبیولوژی

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه شاهد، تهران، ایران،

2 دانشیار، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران،

3 استاد گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شاهد، تهران، ایران.

4 دانشجوی کارشناسی ارشد، مرکز زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین، تهران، ایران

5 کارشناس ارشد، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران

چکیده

ویروس مسری SARS CoV_2 به سرعت در جهان شیوع پیدا کرد. این ویروس بیش از 550 میلیون نفر را در سراسر جهان آلوده کرده و منجر به مرگ حدود 7 میلیون نفر شده است. در سازوکار تهاجم ویروس، زیرواحد متصل شونده به گیرنده (RBD) از پروتئین Spike نقش مهمی در ورود ویروس به سلول میزبان دارد. در این مطالعه، با توجه به رویکردهای بیوانفورماتیکی، طراحی کاست، سازگاری کدون و پایداری پروتئین و درنهایت صحت سازه طراحی شده با بررسی بیان پروتئینی سنجیده شد. برای افزایش احتمال بیان کاست RBD، کدون‌های ژنی و پارامترهای مختلف بهینه شده و تجزیه و تحلیل ترمودینامیکی ساختار mRNA برای افزایش ثبات انجام گردید. ساختار پروتئین سوم نیز پیش‌بینی شد و کیفیت ساختارها ارزیابی شدند. اپی‌توپ‌های خطی و فضایی تعیین شدند. پروتئین نوترکیب RBD بالاترین شاخص آنتی‌ژنی را نشان داد. شاخص سازگاری کدون پروتئین نوترکیب به 96/0 افزایش یافت. ساختار سوم پیش‌بینی شده بر اساس سرور I_TASSER کیفیت خوبی را نشان داد. تجزیه و تحلیل ترمودینامیکی ساختار mRNA نشان داد که ساختار پیش‌بینی شده پایدار است و اپی‌توپ‌های تطبیقی و خطی در هر سه حوزه پروتئین نوترکیب مشاهده شده است. سپس سازه مورد نظر در میزبان باکتریایی بیان شد. نتایج ایمونوانفورماتیکی و بیان نشان داد سازه نوترکیب طراحی شده آنتی‌ژنیسیته و پتانسیل تولید بالایی دارد و می‌می‌تواند به‌عنوان یک کاندید ایمونوژن علیه ویروس SARS CoV_2 در مطالعات بعدی استفاده شود.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


  • Smith, T. R. F.; Patel, A.; Ramos, S.; Elwood, D.; Zhu, X.; Yan, J.; Gary, E. N.; Walker, S. N.; Schultheis, K.; Purwar, M.; Xu, Z.; Walters, J.; Bhojnagarwala, P.; Yang, M.; Chokkalingam, N.; Pezzoli, P.; Parzych, E; Reuschel, E. L.; Doan, A.; Tursi, N.; Vasquez, M.; Choi, J.; Tello-Ruiz, E.; Maricic, I.; Bah, M. A.; Wu, Y.; Amante, D.; Park, D. H.; Dia, Y.; Ali, A. R.; Zaidi, F. I.; Generotti, A.; Kim, K. Y.; Herring, T. A.; Reeder, S.; Andrade, V. M.; Buttigieg, K.; Zhao, G.; Wu, J. M.; Li, D.; Bao, L.; Liu, J;. Deng, W.; Qin, C.; Brown, A. S.; Khoshnejad, M.; Wang, N.; Chu, J.; Wrapp, D.; McLellan, J. S.; Muthumani, K.; Wang, B.; Carroll, M. W.; Kim, J. J.; Boyer, J.; Kulp, D. W.; Humeau, L.; Weiner, D. B.; Broderick, K. E. “Immunogenicity of a DNA Vaccine Candidate for COVID-19”; Nat. Commun. 2020, 11.1, 1-13
  • Tavakoli, A.; Vahdat, K.; and Keshavarz, M.“Novel Coronavirus Disease 2019 (COVID-19): An Emerging Infectious Disease in the 21st Century”; ISMJ, 2020, 22.6, 432-450.
  • Coutard, B.; Valle, C.; de Lamballerie, X.; Canard, B.; Seidah, N. G.; Decroly, E. “The Spike Glycoprotein of the New Coronavirus 2019-nCoV Contains a Furin-Like Cleavage Site Absent in CoV of the Same Clade”; Antiviral Res. 2020, 176, 104742.
  • Thanh Le, T.; Andreadakis, Z.; Kumar, A.; Gómez Román, R.; Tollefsen, S.; Saville, M.; Mayhew, S.“The COVID-19 Vaccine Development Landscape”; Nat. Rev. Drug Discov. 2020, 19.5, 305-306.
  • Wertheim, J. O.; Chu, D. K. ; Peiris, J. S. M.; Kosakovsky Pond, S. L.; Poon, L. L. M.“A Case for the Ancient Origin of Coronaviruses”; J. Virol. 2013, 87.12, 7039-7045.
  • Giandhari, J.; Pillay, S.; Wilkinson, E.; Tegally, H.; Sinayskiy, I.; Schuld, M.; Lourenco, J.; Chimukangara, B.; Lessells, R.; Moosa, Y.; Gazy, I.; Fish, M.; Singh, L.; Khanyile, K.S.; Fonseca, V.; Giovanetti, M.; Alcantara, L.C.; Petruccione, F.; de Oliveira, T.“Early Transmission of SARS-CoV-2 in South Africa: An Epidemiological and Phylogenetic Report”; Int. J. Infect. Dis, 2020, 103, 234-241.
  • Zhang, J.; Zeng, H.; Gu, J.; Li, H.; Zheng, L.; Zou, Q.“Progress and Prospects on Vaccine Development Against SARS-CoV-2”; Vaccines (Basel), 2020, 8, 153.
  • Hussain, A.; Kaler, J.; Tabrez, E.; Tabrez, S.; Tabrez, S. S. M.“Novel COVID-19: A Comprehensive Review of Transmission, Manifestation, and Pathogenesis”; Cureus, 2020, 12.5, ?.
  • Shereen, M. A.; Khan, S.; Kazmi, A.; Bashir, N.; Siddique, R. “COVID-19 Infection: Origin, Transmission, and Characteristics of Human Coronaviruses”; J. Adv. Res. 2020, 24, 91.
  • Weiss, S. R.; Navas-Martin, S. “Coronavirus Pathogenesis and the Emerging Pathogen Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus”; Microbiol. Mol. Biol. Rev: MMBR, 2005, 69, 635-664.
  • Farnoosh, G.; Alishiri, G.; Hosseini Zijoud, S. R.; Dorostkar, R.; Jalali Farahani, A.“Understanding the Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) and Coronavirus Disease (COVID-19) Based on Available Evidence - A Narrative Review”; J. of Military Medicine, 2020, 22, 1-11.
  • Shereen, M. A.; Khan, S.; Kazmi, A., Bashir, N.; Siddique, R. “COVID-19 Infection: Origin, Transmission, and Characteristics of Human Coronaviruses”; J. Adv. Res. 2020, 24, 91.
  • Nazarian, S.; Gargari, S. L. M.; Rasooli, I.; Amani, J.; Bagheri, S.; Alerasool, M. J. J. o. m. m. “An in Silico Chimeric Multi Subunit Vaccine Targeting Virulence Factors of Enterotoxigenic Escherichia Coli (ETEC) with Its Bacterial Inbuilt Adjuvant”; J. Microbiol. Methods, 2012, 90, 36-45.
  • Daugelaite, J.; O'Driscoll, A.; Sleator, R. D. J. I. S. R. N.“An Overview of Multiple Sequence Aignments and Cloud Computing in Bioinformatics”; Int. Scholarly Res. Not. 2013.
  • Manikyam, H. K.; Joshi, S. K. J. J. O. P.; Research, “Whole Genome Analysis and Targeted Drug Discovery Using Computational Methods and High Throughput Screening Tools for Emerged Novel Coronavirus (2019-nCoV)”; J. Pharm. Drug Res. 2020, 3, 341.
  • Puigbo, P.; Romeu, A.; Garcia-Vallve, S. J. N. A. R. “HEG-DB: a Database of Predicted Highly Expressed Genes in Prokaryotic Complete Genomes under Translational Selection”; Nucleic Acids Res. 2007, 36, D524-D527.
  • Srivastava, S.; Verma, S.; Kamthania, M.; Kaur, R.; Badyal, R. K.; Saxena, A. K.; Shin, H. -J.; Kolbe, M.; Pandey, K. C. J. B. “Structural Basis to Design Multi-Epitope Vaccines Against Novel Coronavirus 19 (COVID19) Infection, the Ongoing Pandemic Emergency: an In Silico Approach”; BioRxiv, 2020.
  • Madhugiri, R.; Karl, N.; Petersen, D.; Lamkiewicz, K.; Fricke, M.; Wend, ; Scheuer, R.; Marz, M.; Ziebuhr, J. J. V. “Structural and Functional Conservation of Cis-Acting RNA Elements in Coronavirus 5'-terminal Genome Regions”; Virology, 2018, 517, 44-55.
  • Gasteiger, E.; Hoogland, C.; Gattiker, A.; Wilkins, M. R.; Appel, R. D.; Bairoch, A. J. T. P. P. H.“Protein Identification and Analysis Tools on the ExPASy Server”; The Proteomics Protocols Handbook, 2005, 571-607.
  • Hebditch, M.; Carballo-Amador, M. A.; Charonis, S.; Curtis, R.; Warwicker, J. J. B. “Protein–Sol: a Web Tool for Predicting Protein Solubility from Sequence”; Bioinformatics, 2017, 33, 3098-3100.
  • Ceroni, A.; Passerini, A.; Vullo, A.; Frasconi, P. J. N. A. R. “DISULFIND: A Disulfide Bonding State and Cysteine Connectivity Prediction Server”; Nucleic Acids Res. 2006, 34 , W177-W181.
  • Magnan, C. N.; Zeller, M.; Kayala, M. A.; Vigil, A.; Randall, A.; Felgner, P. L.; Baldi, P. J. B. “High-Throughput Prediction of Protein Antigenicity Using Protein Microarray Data”; Bioinformatics,  2010, 26, 2936-2943.
  • Chukwudozie, O. S.; Duru, V. C.; Ndiribe, C. C.; Aborode, A. ; Oyebanji, V. O.; Emikpe, B. O. J. B.; Insights, B. “The Relevance of Bioinformatics Applications in the Discovery of Vaccine Candidates and Potential Drugs for COVID-19 Treatment”; Bioinf. Biol. Insights, 2021, 15, 11779322211002168.
  • Sadat, S. M.; Aghadadeghi, M. R.; Yousefi, M.; Khodaei, A.; Larijani, M. S.; Bahramali, G. J. M. B. “Bioinformatics Analysis of SARS-CoV-2 to Approach an Effective Vaccine Candidate Against COVID-19”; Mol. Biotech. 2021, 63, 389-409.‏
  • Dangi, M.; Kumari, R.; Singh, B.; Chhillar, A. K. “Advanced in Silico Tools for Designing of Antigenic Epitope as Potential Vaccine Candidates Against Coronavirus”; Bioinformatics, 2018, 329-357.
  • Yazdani, Z.; Rafiei, A.; Yazdani, M.; Valadan, R.J.I.; Resistance, D.“Design an Efficient Multi-Epitope Peptide Vaccine Candidate Against SARS-CoV-2: An In Silico Analysis”; Infect. Drug Resist, 2020, 13, 3007.
  • Chen, H. -Z.; Tang, L. -L.; Yu, X. -L.; Zhou, J.; Chang, Y. -F.; Wu, X. J. I. D. O. P. “Bioinformatics Analysis of Epitope-Based Vaccine Design Against the Novel SARS-CoV-2”; Infect. Dis. Poverty, 2020,  9, 1-10.
  • Can, H.; Köseoğlu, A. E.; Alak, S. E.; Güvendi, M.; Döşkaya, M.; Karakavuk, M.; Gürüz, A. Y.; Ün, C. J. S. R. “In Silico Discovery of Antigenic Proteins and Epitopes of SARS-CoV-2 for the Development of a Vaccine or a Diagnostic Approach for COVID-19”; Sci. Rep. 2020, 10, 1-16.
  • Yang, J; Wang, W; Chen, Z; Lu, S; Yang, F; Bi, Z; Wei, X. “A Vaccine Targeting the RBD of the S Protein of SARS-CoV-2 Induces Protective Immunity”; Nature, 2020, 586, 572-577.‏
  • Djukic, T; Mladenovic, M.; Stanic-Vucinic, D.; Radosavljevic, J.; Smiljanic, K.; Sabljic, L.; Velickovic, T. C. “Expression, Purification and Immunological Characterization of Recombinant Nucleocapsid Protein Fragment from SARS-CoV-2”; Virology, 2021 , 557, 15-22.‏