تثبیت و هیبریداسیون DNA/DNA ژن rfbE باکتری Escherichia coli O157:H7روی سطح الکترود طلا برای تشخیص توالی خاص به‌روش طیف‌بینی امپدانس الکتروشیمیایی

نویسندگان

نانوبیوتکنولوژی

چکیده

در این تحقیق، تثبیت و هیبریداسیون توالی تک رشته DNA ssDNA)) مربوط به ژن rfbE باکتری Escherichia coli O157:H7 به‌روش
طیف‌بینی امپدانس الکتروشیمیایی مورد بررسی قرار گرفته است. این توالی به‌صورت تک‌لایه خودتجمعی، روی سطح الکترود طلا به‌مدت سه ساعت و در دمای محیط (C25) تثبیت شد. تک‌لایه مخلوط شامل مرکاپتوهگزانول و مرکاپتوپروپیونیک اسید به‌ عنوان یک طراحی رابط برای توسعه بیوسنسور مورد استفاده قرار گرفت. هیبریداسیون DNA/DNA با غوطه‌ورسازی الکترود طلای اصلاح شده با ssDNA در غلظت 1 میکرومولار DNA هدف در محلول بافر فسفات (pH برابر 4/7) انجام شد. از روش‌های ولتامتری چرخه‌ای و طیف‌بینی امپدانس الکتروشیمیایی برای بررسی تثبیت و هیبریداسیون DNA استفاده شد. نتایج، نشان‌دهنده تثبیت و هیبریداسیون مناسب DNA در سطح الکترود طلا می‌باشد. حسگر طراحی شده از گزینش‌پذیری خوبی برخوردار بود. این تحقیق زمینه‌ساز توسعه آتی نوعی نانوزیست حسگر الکتروشیمیایی به‌منظور آشکارسازی عوامل بیولوژیک می‌باشد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Immobilization and Hybridization of DNA/DNA of the rfbE Gene Escherichia Coli O157:H7 on Gold Electrode Surface for the Detection of Specific Sequences by Electrochemical Impedance Spectroscopy Method

نویسندگان [English]

  • M E. Minaei
  • M. Saadati
  • M. Najafi
  • H. Honari
چکیده [English]

In this paper, the immobilization and hybridization of single strand DNA (ssDNA) sequences of rfbE gene Escherichia coli O157:H7 has been studied by electrochemical impedance spectroscopy technique. A self-assembled monolayer of the ssDNA was immobilized on the gold electrode for three hours at ambient temperature (25C). A mixed monolayer comprising both mercaptohexanol (MCH) and mercaptopropionic acid (MPA) were used as an interface design for developing biosensor. The hybridization of DNA/DNA was performed by immersion the modified gold electrode with ssDNA at a concentration of target DNA, 1 μM in the phosphate buffer solution (pH 7.4). Cyclic voltammetry and electrochemical impedance spectroscopy techniques were used for investigation of the DNA immobilization and hybridization. Results showed that immobilization and hybridization of DNA on gold electrode is suitable. This research underlie the future development of nanobiosensor electrochemical for detection of biological agents.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Hybridization DNA/DNA
  • Electrochemical Impedance Spectroscopy
  • Biosensor