@article { author = {هنری, حسین and مهرآذین, هاجر and سعادتی, مجتبی and علیزاده, هوشنگ and نظریان, شهرام}, title = {Production of Polyclonal Antibody against Domain 4 of Protective Antigen of Bacillus anthracis in Laboratory Animals}, journal = {Journal of Advanced Defense Science & Technology}, volume = {2}, number = {1}, pages = {19-25}, year = {2011}, publisher = {Imam Hussein University}, issn = {2676-2935}, eissn = {2980-8022}, doi = {}, abstract = {Abstract Anthrax caused by Bacillus anthracis, is an acute infectious disease that most commonly occurs in herbivorous animals and human. The vegetative state of Bacillus anthracis has a triplex exotoxin, which consists of three polypeptide: protective antigen (PA, 83 kDa), lethal factor (LF, 90 kDa) and edema factor (EF, 89kDa). PA is considered a primary immunogen for the development of protective immunity against anthrax. This study aims to produce polyclonal antibody in laboratory animals. Domain 4 gene was amplified by PCR from pXOI and inserted into expression plasmid pET28a (+) to create the recombinant pET28a (+)/domain4. The pET28a (+)/domain 4 expression vector confirmed by endonuclease digestion, PCR and sequence analysis. The expression of product domain 4 was confirmed by SDS-PAGE. After induced by IPTG, the expression of product domain 4 was analyzed and then was injected to mice and rabbits. All groups received injection four times in 15 days intervals. Finally, the antibody in animals’ sera was confirmed by ELISA and western blotting tests.}, keywords = {Bacillus Anthracis,Protective Antigen (PA),Polyclonal Antibody}, title_fa = {تولید آنتی بادی پلی‌کلونال علیه ناحیه 4 آنتی‌ژن محافظت‌کننده باسیلوس آنتراسیس در حیوانات آزمایشگاهی}, abstract_fa = {چکیده آنتراکس (سیاه زخم یا شاربن) یک بیماری مشترک بین انسان و دام بوده و عامل آن باکتری باسیلوس آنتراسیس می‌باشد. فرم رویشی باسیلوس آنتراسیس دارای یک اگزوتوکسین سه جزیی بوده که شامل سه آنتی‌ژن حفاظت‌کننده (83 کیلو دالتون)، فاکتور کشنده (90 کیلو دالتون) و فاکتور ادم (89 کیلو دالتون) می‌باشد. آنتی‌ژن حفاظت‌کننده به‌عنوان یک ایمونوژن اولیه برای توسعه ایمنی حفاظتی علیه آنتراکس بررسی شده است. ژن از پلاسمید pXOI با جایگاه‌های آنزیمی BamHI و XhoI تکثیر و به کلونینگ وکتور و بعد از جداسازی به وکتور pET28a(+) همسانه‌سازی و به باکتری E.coli سویه BL21(DE3) ترانسفورم شد. ناحیه 4ژن آنتی‌ژن محفاظت‌کننده (PA) کلون شده در وکتور بیانی pET28a(+) به‌وسیله توالی‌یابی، PCR و آنالیز آنزیمی، هم‌چنین پروتئین تولیدی به‌وسیله SDS-PAGE مورد تأیید قرار گرفت. بیان ژن PA با القای IPTG انجام و پروتئین تولید و تخلیص شده در 4 نوبت با فاصله 15 روز به موش و خرگوش‌ تزریق شد. سپس آنتی بادی تولید شده از سرم موش و خرگوش جداسازی و توسط تست الایزا و وسترن بلات تایید گردید.}, keywords_fa = {باسیلوس آنتراسیس,آنتی‌ژن محافظتی,آنتی‌بادی پلی‌کلونال}, url = {https://adst.ihu.ac.ir/article_204018.html}, eprint = {https://adst.ihu.ac.ir/article_204018_701f38a6f984c8af6c94da32b59a73b7.pdf} }